简介：
默克密理博的Amicon离心超滤装置是一种理想的工具，可以用来对盐分、糖类、核酸、非水溶剂及其他一些低分子量物质进行去除和更换。他们还可以用来分离未结合上的游离标记物。
密理博离心超滤装置具有快速、方便、回收率高的特点，可替代并优于透析及乙醇沉淀。Amicon Ultra-4和Amicon Ultra-15具有高速度高回收的特点。他们使用低吸附性的Ultracel再生纤维素超滤膜，可用于蛋白质、抗原、抗体、酶和微生物的浓缩纯化。其快速和高回收的特点非常适合于脱盐和缓冲液置换。Amicon Ultra离心超滤装置经常用于对蛋白质色谱纯化过程产生的色谱柱组分进行浓缩和脱盐。
以下两个例子展示了Amicon Ultra离心超滤装置对于蛋白质和活性酶回收的应用。
方法
1. 选择具有合适NMWL和体积的离心超滤装置；
2. 把样品置于过滤装置的储液管中；
3. 如果样品体积小于过滤装置的最大体积，则可以把它稀释到最大体积后再离心，这有助于更有效地除去盐分；
4. 在特定的离心力下和推荐的时间进行离心；
5. 将滤过液从滤管中取出，放置一旁；
6. 加入水或缓冲液使样品体积达到4ml(Amicon Ultra-4)或15ml(Amicon Ultra-15);
7. 再次离心；
8. 取出滤过液，放置一旁；
9. 回收浓缩的已脱盐样品。
注意：请将两次的滤过液一直保留到浓缩的样品分析测试完成。
结果：
盐分通过滤膜的过程不依赖样品的浓度和体积，用超滤的方法来脱盐并不改变缓冲液的组成，比如说，含有500mM盐分的溶液在初次离心后它的盐浓度并不发生改变。再往超滤管中剩余溶液中加入水或无盐缓冲液，再次离心，则会降低溶液中的盐浓度。这个过程我们将它称为等体积超滤，反复多次地操作，可以使溶液盐分降到最低。如果我们想将样品用不同打分缓冲液溶解，则我们可以使用等体积超滤达到目的。样品浓缩后，然后加入目的缓冲液，再进行反复得稀释和浓缩。
如表3.1-3.4中所示，使用默克密理博的离心超滤装置，只需一次过滤，样品中90%以上的盐分都被去除。最后，只要再离心一次，可以使样品中高达99%的盐分都被去除，而且样品的回收率高达90%以上。
用色谱法进行蛋白质纯化，经常得到许多的色谱组分，而其中只有一些组分中含有目标蛋白质。将这些组分合并后，我们就可能需要通过一步蛋白质浓缩过程将蛋白质储存起来，或者需要通过缓冲液置换将样品浓缩，以便下游的分离。若有疑问，请致电技术支持热线：400-889-1988 或致函china.bioscience.marketing@merckgroup.com
下期预告：
吲哚胺2,3-二氧化酶的浓缩
蛋白激酶R的浓缩和缓冲液置换
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